Лекция № 2 Морфология и физиология бактерий и методы её изучения
VII. Культивирование вирусов
Основные методы культивирования вирусов:
· биологический – заражение лабораторных животных. При заражении вирусом животное заболевает. Если болезнь не развивается, то патологические изменения можно обнаружить при вскрытии. У животных наблюдаются иммунологические сдвиги. Однако далеко не все вирусы можно культивировать в организме животных;
· культивирование вирусов в развивающихся куриных эмбрионах. Куриные эмбрионы выращивают в инкубаторе 7—10 дней, а затем используют для культивирования. В этой модели все типы зачатков тканей подвержены заражению. Но не все вирусы могут размножаться и развиваться в куриных эмбрионах.
В результате заражения могут происходить и появляться:
- гибель эмбриона;
- дефекты развития: на поверхности оболочек появляются образования – бляшки, представляющие собой скопления погибших клеток, содержащих вирионы;
- накопление вирусов в аллантоисной жидкости (обнаруживают путем титрования);
- размножение в культуре ткани (это основной метод культивирования вирусов).
О репродукции вирусов в культуре ткани судят по их цитопатическому действию, которое носит разный характер в зависимости от вида вируса.
Основные проявления цитопатического действия вирусов:
- размножение вируса может сопровождаться гибелью клеток или морфологическими изменениями в них;
- некоторые вирусы вызывают слияние клеток и образование многоядерного синцития;
- клетки могут расти, но делиться, в результате чего образуются гигантские клетки;
- в клетках появляются включения (ядерные, цитоплазматические, смешанные), включения могут окрашиваться в розовый цвет (эозинофильные включения) или в голубой (базофильные включения);
- если в культуре ткани размножаются вирусы, имеющие гемагглютинины, то в процессе размножения клетка приобретает способность адсорбировать эритроциты (гемадсорбция).